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crisprcas9的原理 crispr cas9原理圖

更新時間:2023-09-08 19:51:57作者:佚名

crisprcas9的原理 crispr cas9原理圖

此系統(tǒng)的工作原理是crRNA(CRISPR-derivedRNA)通過堿基配對與tracrRNA(trans-activatingRNA)結(jié)合形成tracrRNA/crRNA復(fù)合物,此復(fù)合物引導(dǎo)核酸酶Cas9蛋白在與crRNA配對的序列靶位點(diǎn)剪切雙鏈DNA。而通過人工設(shè)計(jì)這兩種RNA,可以改造形成具有引導(dǎo)作用的sgRNA(singleguideRNA),足以引導(dǎo)Cas9對DNA的定點(diǎn)切割。

作為一種RNA導(dǎo)向的dsDNA結(jié)合蛋白,Cas9效應(yīng)物核酸酶是已知的第一個統(tǒng)一因子(unifyingfactor),能夠共定位RNA、DNA和蛋白,從而擁有巨大的改造潛力。將蛋白與無核酸酶的Cas9(Cas9nuclease-null)融合,并表達(dá)適當(dāng)?shù)膕gRNA,可靶定任何dsDNA序列,而sgRNA的末端可連接到目標(biāo)DNA,不影響Cas9的結(jié)合。因此,Cas9能在任何dsDNA序列處帶來任何融合蛋白及RNA,這為生物體的研究和改造帶來巨大潛力。

本文標(biāo)簽: 原理  

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